準(zhǔn)確稱取試樣5.0 g于50 mL離心管中，加入1 g NaCl，準(zhǔn)確加入20 mL乙腈-水（6+4，v/v）溶液，震蕩30 min或高速勻質(zhì)2 min。濾紙過濾，準(zhǔn)確移取2.0 mL上清液加入18.0 mL 1% Tween-20 pH 7.0 PBS稀釋，混勻，備用。

準(zhǔn)確稱取試樣5.0 g于50 mL離心管中，加入1 g NaCl，準(zhǔn)確加入20 mL甲醇-水（8+2，v/v）溶液，震蕩30 min或高速勻質(zhì)2 min。濾紙過濾，準(zhǔn)確移取5.0 mL濾液并加入45.0 mL pH 7.0 PBS稀釋，用玻璃纖維濾紙過濾（SCEQ-GF07110），至濾液澄清，量取20 mL濾液，備用。

將上步20 mL濾液以1-2滴/秒的流速全部通過親和柱,直至空氣進入親和柱。將10 mL pH 7.0 PBS溶液以1-2滴/秒的流速通過親和柱（切記洗脫前不要用水洗，否則影響柱子穩(wěn)定性），直至空氣進入親和柱。將3 mL甲醇-乙酸溶液( 98+2 )以1滴/秒的流速洗脫親和柱，將洗脫液收集于玻璃試管中。50 ℃下氮氣濃縮吹干后，用50%甲醇水定容至0.5 mL或1.0 mL，供HPLC或LC-MS分析。

準(zhǔn)確稱取試樣25.0 g于250 mL具塞錐形瓶中，加入5.0 g氯化鈉，準(zhǔn)確加入100.0 mL,80%甲醇水，以均質(zhì)器高速攪拌提取2min。濾紙過濾后準(zhǔn)確移取5 mL濾液，然后用pH 7.0 PBS溶液定容至50 mL，用玻璃纖維濾紙過濾（SCEQ-GF07110），取濾液10 mL，備用。

準(zhǔn)確稱取試樣40.0 g于250 mL具塞錐形瓶中，加入5.0 g氯化鈉及準(zhǔn)確加入100.0 mL乙腈，以均質(zhì)器高速攪拌提取2 min。濾紙過濾，準(zhǔn)確移取20.0 mL濾液，50℃氮氣吹干儀下氮吹，吹干后，加入1 mL甲醇溶解沉淀物，然后用pH 7.0 PBS溶液定容至20 mL，用玻璃纖維濾紙過濾，取濾液10 mL，備用。

將免疫親和柱連接于10.0 mL玻璃注射器下。準(zhǔn)確移取10.0 mL樣品提取液注入玻璃注射器中，將空氣壓力泵與玻璃注射器連接，調(diào)節(jié)壓力使溶液以約2 mL/min（1滴/秒）流速緩慢通過免疫親和柱，直至2~3 mL空氣通過柱體。以2-3 mL/min（1-2滴/秒）流速用10.0 mL水淋洗柱子2次，棄去全部流出液，并使2mL~3 mL空氣通過柱體。準(zhǔn)確加入1.0 mL色譜級甲醇洗脫，流速為1 mL/min ~2 mL/min（1滴/秒），收集全部洗脫液于玻璃試管中，供檢測用。