C18液相色譜柱是高效液相色譜(HPLC)分析中的關(guān)鍵部件,其性能優(yōu)劣直接影響到分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。為了確保高效穩(wěn)定運行,必須對其進行妥善的維護與保養(yǎng)。 一、使用前的準(zhǔn)備
在使用之前,先要進行沖洗,以去除柱內(nèi)可能存在的雜質(zhì)和污染物。通常采用甲醇或乙腈作為沖洗溶劑,按照一定流速連續(xù)沖洗數(shù)小時,直至流出液清澈無雜質(zhì)。
二、使用過程中的注意事項
避免過載:確保進樣量不超過柱子的承載能力,避免因過載而導(dǎo)致柱效下降。
控制流速:根據(jù)柱子的規(guī)格和實驗要求,合理設(shè)置流速,避免過快或過慢影響分離效果。
保持恒溫:液相色譜系統(tǒng)應(yīng)配備恒溫裝置,確保柱溫穩(wěn)定,防止因溫度波動而影響分離效果。
定期清洗:在分析過程中,定期用適當(dāng)?shù)娜軇┣逑粗樱コe累的污染物。
三、使用后的保養(yǎng)
及時沖洗:每次使用完畢后,立即用甲醇或乙腈沖洗柱子,以防止樣品殘留物干涸在填料表面。
長期保存:若長時間不使用C18液相色譜柱,應(yīng)將其充滿適當(dāng)?shù)娜軇┎⒚芊獗4妫乐箍諝庵械乃趾脱鯕馇秩雽?dǎo)致柱子性能下降。
四、常見問題及解決方法
柱壓升高:可能是由于填料堵塞或柱頭污染所致。可嘗試用較強溶劑沖洗柱子,或拆卸柱頭進行清洗。
峰形畸變:可能是由于柱效下降或樣品污染所致。可通過更換柱子或調(diào)整進樣量來解決。
保留時間漂移:可能是由于溫度波動或溶劑組成變化所致。應(yīng)確保恒溫裝置正常工作,并盡量保持溶劑組成穩(wěn)定。
C18液相色譜柱的維護與保養(yǎng)是一項細致而重要的工作。只有嚴格按照上述方法進行操作,才能確保柱子的性能穩(wěn)定,延長使用壽命,為分析工作提供可靠保障。